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化妝品微生物標準檢驗方法

1 樣品的采集及注意事項
1.1所采集的樣品,應具有代表性,一般視每批化妝品數量大小,隨機抽取相應數量的包裝單位。檢驗時,應分別從兩個包裝單位以上的樣品中共取10g或10ml。包裝量小的樣品,取樣量可酌減。
1.2供檢樣品,應嚴格保持原有的包裝狀態。容器不應有破裂,在檢驗前不得啟開,以防再污染。
1.3接到樣品后,應立即登記,編寫檢驗序號,并按檢驗要求盡快檢驗。如不能及時檢驗,樣品應放在室溫陰涼干燥處,不要冷藏或冷凍。
1.4若只有一個樣品而同時需做多種分析,如細菌、毒理、化學等,則宜先取出部分樣品作細菌檢驗,再將剩余樣品作其他分析。
1.5在檢驗過程中,從開封到全部檢驗操作結束,均須防止微生物的再污染和擴散,所用器皿及材料均應事先滅菌,全部操作應在無菌室內進行。或在相應條件下,按無菌操作規定進行。
1.6如檢出糞大腸菌群或其他致病菌,自報告發出起該菌種及被檢樣品應保存一個月奮查。
2 供檢樣品的制備
2.1培養基和試劑
2.1.1生理鹽水:氯化鈉 8.5g,蒸餾水 1000m溶解后,分裝到加玻璃珠的錐形瓶內,每瓶90ml,121℃(151b)20min高壓滅菌。
2.1.2SCDLP液體培養基,成分: 酪蛋白胨 17g,大豆蛋白胨 3g,氯化鈉 5g,磷酸氫二鉀 2.5g,葡萄糖 2.5g,卵磷脂 1g,吐溫80 。7g,蒸餾水 1000ml,制法:將上述成分混合后,加熱溶解,調pH為7.2?.3分裝,121℃(151b)20min高壓滅菌。注意振蕩,使沉淀于底層的法溫80充分混合,冷卻至25℃左右使用。
注:如無酪蛋白胨和大豆蛋白胨,也可用日本多胨代替。
2.1.3滅菌液體石蠟。
2.1.4滅菌吐溫80。
2.2.儀器:
2.2.1天平.
2.2.2滅菌的錐形瓶:內含玻璃珠及90ml稀釋液.
2.2.3滅菌刻度吸管:10ml、5ml。
2.2.4水浴箱。
2.2.5滅菌研體及滅菌研棒。
2.2.6均質器。
2.3不同類型樣品的檢樣制備。
2.3.1液體樣品:
2.3.1.1水溶性的液體樣品,可量取10ml加到90ml滅菌生理鹽水中,如樣品不少于10ml。仍按10倍稀釋法進行。如為5ml則加45ml滅菌生理鹽水,混勻后,制成1:10稀釋液。,
2.3.1.2油性液體。取樣品10ml,先加5ml來菌液體石蠟混勻,再加10ml滅菌的吐溫80,在40~44℃水浴中振蕩混合10min,加入滅菌的生理鹽水75ml(在44~44℃水浴中預溫),在40~44℃水浴中乳化,制成1:10的懸液。
2.3.2膏、霜、乳劑半固體狀樣品。
2.3.2.1親水性的樣品,稱取10g,加到滅菌的帶玻璃珠加有90ml滅菌生理鹽水的錐形瓶中,充分振蕩混勻,放32℃水浴靜置15min。用其上青液作為1:10的稀釋液。
2.3.2.2疏水性的樣品,稱取10g,放到滅菌的研缽中,加10ml滅菌液體石蠟,研磨成粘稠狀,再加10ml滅菌吐溫80,研磨待溶解后,加70ml滅菌生理鹽水,在40~44℃水浴充分混合,制成1:10稀釋液。
2.3.2.3固體樣品,稱取10g,加到滅菌的生理鹽水稀釋瓶中,振蕩混勻,使其分散混懸后,放30~32℃水浴中,15min后取出,充分振蕩混合,再放到30~32℃水浴中靜置15min,取上清液作為1:10的稀釋液。如有均質器,上述水溶性膏、霜、粉劑等,可稱10g樣品加到90ml滅菌生理鹽水,均質1~2min;疏水性膏、霜及眉筆、口紅等,稱10g樣品加到90MLSCDLP液體培養基,或1g樣品加1ml滅菌液體石蠟、1ml滅菌吐溫80、7ml滅菌生理鹽水,均質3~5min。
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